सूक्ष्मजीव सूक्ष्म जीवों का एक समूह है जो प्रकृति में व्यापक रूप से वितरित होते हैं और नग्न आंखों के लिए अदृश्य होते हैं, जिनमें बैक्टीरिया, स्पाइरोकेट्स, रिकेट्सियस, क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज़्मा, एक्टिनोमाइसेट्स, कवक, वायरस आदि शामिल हैं, सरल संरचना के साथ, और एकल कोशिका में मौजूद हैं। सेल समूह या गैर-सेल राज्य। पोषक तत्व और उपयुक्त वातावरण प्रदान करने की शर्तों के तहत, वे आम तौर पर स्वतंत्र रूप से रह सकते हैं और तेजी से बढ़ सकते हैं। सूक्ष्मजीवों की मृत्यु और प्रदूषण से बचने के लिए, उनके मूल गुणों को मूल रूप से स्थिर रखने और अनुसंधान और उपयोग को सुविधाजनक बनाने के लिए, तनाव संरक्षण की तकनीक का उपयोग करना आवश्यक है। यहाँ जीवाणुओं के संरक्षण के लिए कुछ सामान्य तरीके दिए गए हैं।
क्रायो संरक्षण
यह विधि अधिकांश सूक्ष्मजीवों और विषाणुओं के लिए उपयुक्त है जिन्हें दीर्घकालिक संरक्षण की आवश्यकता होती है। सिद्धांत यह है कि अति-कम तापमान वाले वातावरण में, माइक्रोबियल चयापचय गतिविधि बंद हो जाती है, और आमतौर पर तापमान जितना कम होता है, उतना ही बेहतर प्रभाव पड़ता है।
बचत विधि
बैक्टे को संरक्षित करने के लिए क्रायो प्रिजर्वेशन ट्यूब का उपयोग करेंरिया, और एक ही समय में ग्लिसरीन, degreased भेड़ पाउडर या डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड जैसे सुरक्षात्मक एजेंटों की आवश्यकता होती है। जमी हुई भंडारण ट्यूब जिसमें जीवाणु होते हैं, को ठंड और भंडारण के लिए - 60~- 80 डिग्री पर रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है।
तरल पैराफिन संरक्षण विधि
तरल पैराफिन संरक्षण विधि कुछ जीवाणुओं पर लागू होती है जो पैराफिन को विघटित नहीं कर सकते, जैसे कि खमीर, बैसिलस, पेनिसिलियम, एस्परगिलस, आदि। कुछ बैक्टीरिया और कवक इस विधि द्वारा संरक्षण के लिए उपयुक्त नहीं हैं। तरल पैराफिन विधि तरल पैराफिन को कवर करने के लिए उपयोग करती है, माइक्रोबियल चयापचय बाधित होता है, और बैक्टीरिया की उम्र बढ़ने में देरी होती है। पैराफिन विधि ऑक्सीजन को प्रवेश करने से रोक सकती है, जिससे एरोबिक बैक्टीरिया बढ़ने में असमर्थ हो जाते हैं। साथ ही, अगर संस्कृति माध्यम में पानी वाष्पित हो जाता है, तो बैक्टीरिया की मौत का कारण बनना आसान होता है। पैराफिन विधि संस्कृति माध्यम में पानी को वाष्पित होने से रोक सकती है और बैक्टीरिया के संरक्षण के समय को बढ़ा सकती है।
बचत विधि
बाँझ शर्तों के तहत, नव खेती तिरछी संस्कृति में निष्फल तरल पैराफिन इंजेक्ट करें, तरल स्तर तिरछा के शीर्ष से 1 सेमी ~ 2 सेमी अधिक है, हवा से बैक्टीरिया को अलग करने के लिए रबर डाट और ठोस पैराफिन के साथ सील जोड़ें। पैराफिन तेल के साथ इंजेक्ट किया गया तनाव कम तापमान (4 डिग्री ~ 6 डिग्री) या कमरे के तापमान पर एक सूखी जगह में सीधे संग्रहित किया जाएगा।
फ्रीज-सुखाने संरक्षण विधि
यह विधि अधिकांश सूक्ष्मजीवों के संरक्षण के लिए उपयुक्त है, लेकिन फिलामेंटस कवक के लिए नहीं जो बीजाणुओं का उत्पादन नहीं करते हैं। फ्रीज-सुखाने संरक्षण विधि बैक्टीरिया को कम तापमान, शुष्क और अनॉक्सी परिस्थितियों में संरक्षित करना है। यही है, सूक्ष्मजीव को अक्षुण्ण रखने के लिए कम तापमान के तहत तनाव को जल्दी से जमा दें, और फिर निर्जलित और सूखने तक बर्फ को अलग करने के लिए डीकंप्रेस और हवा निकालें, और माइक्रोबियल चयापचय गतिविधि को रोकने के लिए खाली अवस्था में हवा को सील और अलग करें। ताकि इसे लंबे समय तक सुरक्षित रखा जा सके।
बचत विधि
निश्चित सूत्र के अनुसार ampoule ट्यूब में सुरक्षात्मक एजेंट जोड़ें, और फिर जीवाणु निलंबन तैयार करने के लिए बैक्टीरिया जोड़ें। ampoule ट्यूब को - 15~- 20 डिग्री तक प्री-फ्री करना, फिर ampoule ट्यूब को फ्रीज वैक्यूम ड्रायर से सुखाएं, और ampoule ट्यूब को सील कर दें। कम तापमान पर और प्रकाश से दूर रखें।
रेत ट्यूब संरक्षण विधि
यह विधि स्पोरोजेनस एक्टिनोमाइसेट्स, बैसिलस आदि के संरक्षण के लिए उपयुक्त है, लेकिन कवक और रोगजनक कवक के संरक्षण के लिए नहीं है जो मुख्य रूप से हाइपल विकास पर ध्यान केंद्रित करते हैं। शुष्क स्थिति पैदा करने के लिए महीन रेत का उपयोग उन सूक्ष्मजीवों की चयापचय गतिविधियों को धीमा कर सकता है जो शुष्क वातावरण में बीजाणु या बीजाणु पैदा कर सकते हैं, उनकी प्रजनन गति को बाधित कर सकते हैं और मृत्यु के लिए मजबूत प्रतिरोध कर सकते हैं। यह विधि तनाव उत्परिवर्तन को कम कर सकती है और जीवित रहने का समय बढ़ा सकती है।
बचत विधि
60 जाली के साथ नदी और समुद्री रेत को छान लें, बड़े कणों और अशुद्धियों को त्याग दें, और फिर महीन रेत को हटाने के लिए 80 जाली के साथ छलनी करें। लोहे के अवशोषण वाले पत्थर से लोहे को अवशोषित करें, इसे कंटेनर में डालें और इसे 10 प्रतिशत हाइड्रोक्लोरिक एसिड में भिगो दें। यदि नदी की रेत में कार्बनिक पदार्थ अधिक हों तो उसे 20 प्रतिशत हाइड्रोक्लोरिक अम्ल में भिगो दें। 24 घंटों के बाद, हाइड्रोक्लोरिक एसिड को हटा दें, इसे नल के पानी में तटस्थ होने तक कई बार भिगोएँ, और रेत को बेक या सुखाएँ। इसके अलावा, बिना दूषित सतह के नीचे की दस मिट्टी को 100 दिनों के लिए जांचा गया, नल के पानी से तटस्थ करने के लिए धोया गया और सुखाया गया। रेत के अनुसार समान रूप से मिलाएं: मिट्टी =2: 1, उप-पैक ampoule ट्यूब या छोटी टेस्ट ट्यूब में, ऊंचाई लगभग 1cm है, कपास प्लग प्लग करें, 1h ~ 1.5h के लिए 121 डिग्री पर आटोक्लेव, या आटोक्लेव पर सामान्य दबाव 3 बार, दिन में 16 बार। इसे 50 डिग्री के नीचे सुखाएं (तापमान बहुत अधिक नहीं होना चाहिए, अन्यथा मिट्टी के कार्बनिक पदार्थ उच्च तापमान से हानिकारक पदार्थों का उत्पादन करने के लिए विघटित हो जाएंगे, जो तनाव के प्रदर्शन को प्रभावित करेगा), और इसका उपयोग केवल तभी किया जा सकता है जब कोई न हो निरीक्षण के बाद माइक्रोबियल विकास।
फिर बैक्टीरियल सस्पेंशन तैयार करें और बैक्टीरियल सस्पेंशन को सैंड पाइप में डालें। वैक्यूम सुखाने के लिए वैक्यूम ड्रायर में बैक्टीरियल सस्पेंशन युक्त सैंड पाइप लगाएं। नोजल को सील करने और पिघलाने के लिए लौ का उपयोग करें, इसे कम तापमान (4 डिग्री ~ 10 डिग्री) या सामान्य तापमान पर सूखी जगह पर स्टोर करें, और नियमित रूप से जीवन शक्ति और विविध बैक्टीरिया की जांच करें।
चीनी मिट्टी के बरतन मनका संरक्षण विधि
आमतौर पर समाप्त चीनी मिट्टी के मनका संरक्षण ट्यूब होते हैं जो बैक्टीरिया के कम तापमान के संरक्षण के लिए बाजार में उपयोग में आसान होते हैं। चीनी मिट्टी के बरतन मनका संरक्षण ट्यूब आमतौर पर एक जमे हुए भंडारण ट्यूब, साथ ही आंतरिक संरक्षण समाधान और चीनी मिट्टी के बरतन मोतियों से बना होता है। अवतल और उत्तल सतह वाले चीनी मिट्टी के मोती का उपयोग जीवाणुओं के सोखने और संरक्षण के लिए किया जाता है। तनाव को - 20 डिग्री या - 80 डिग्री पर लंबे समय तक संग्रहीत किया जा सकता है। भंडारण में या पुनर्जीवन में इसे संचालित करना आसान है।
बचत विधि
प्लेट से बैक्टीरिया के शुद्ध कल्चर को परिमार्जन करें और इसे कल्चर प्रिजर्वेशन ट्यूब में डालें, और मोटे तौर पर इसे 3-4 माइकलिस सांद्रता में कॉन्फ़िगर करें। बैक्टीरिया को इमल्सीफाइड बनाने के लिए हिलाएं, प्रिजर्वेशन सॉल्यूशन को धोएं, प्रिजर्वेशन ट्यूब को कसें और कम तापमान पर फ्रीज करें।
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