जो मित्र कोशिका संबंधी प्रयोग करते हैं, वे प्रायः कोशिका हिमीकरण विधियों का प्रयोग करते होंगे। संक्षेप में, सेल फ्रोजन स्टोरेज लंबी अवधि के संरक्षण के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए कम तापमान वाले वातावरण में कोशिकाओं को बचाने के लिए है। संचरण प्रक्रिया के दौरान कोशिकाओं में कुछ हद तक उत्परिवर्तन होगा। यह सुनिश्चित करने के लिए कि कोशिका प्रदूषण और उत्परिवर्तन के मामले में अभी भी कोशिकाओं का उपयोग किया जा सकता है, कुछ कोशिकाओं को आमतौर पर ठंड के लिए उपयोग किया जाता है।
सेल जमे हुए का सिद्धांत
सेल फ्रोजन और रिकवरी की प्रक्रिया में एक सिद्धांत "धीमी गति से फ्रोजन फ्यूजन" है ताकि कोशिकाओं की जीवन शक्ति को अधिकतम तक बचाया जा सके। सीधे शब्दों में कहें तो जमने और ठंडा होने पर इसे धीमा करने की जरूरत होती है और कम तापमान से उबरने पर इसे तेजी से गर्म करने की जरूरत होती है। धीमी गति से जमने का कारण यह है कि यदि कोशिकाओं को तरल नाइट्रोजन जैसे अल्ट्रा-निम्न तापमान वाले वातावरण में सीधे रखा जाता है, तो कोशिकाएं एक बड़े बर्फ के क्रिस्टल का निर्माण करती हैं, जो कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाएगा।
यदि आप इसे धीरे-धीरे फ्रीज करते हैं, तो कोशिकाओं की सुरक्षा के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए कोशिकाओं को धीरे-धीरे निर्जलित किया जा सकता है। इसके अलावा, ठीक होने पर, यह छोटे बर्फ के क्रिस्टल को बड़े बर्फ के क्रिस्टल, यानी बर्फ के क्रिस्टल के भारी क्रिस्टल को बनने से रोकने के लिए भी है। इसलिए, जब हर कोई आमतौर पर सेल फ्रोजन करता है, तो यह हमेशा कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाता है, जिससे ठंड के चरण में प्रभाव पड़ने की संभावना है।
सेल जमने के कई तरीके
मैनुअल विधि: जमे हुए सेल को आमतौर पर तरल नाइट्रोजन में संग्रहित किया जाता है। मैनुअल ऑपरेशन विधि रेफ्रिजरेटर में ढाल को ठंडा करना है। कोशिकाओं को जमे हुए भंडारण ट्यूब में सहेजें, और उन्हें क्रम में 4 डिग्री सेल्सियस, -20 डिग्री सी, -80 डिग्री सी के रेफ्रिजरेटर वातावरण में रखें। तरल नाइट्रोजन में स्थानांतरित करने से पहले -80 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए जमे हुए। मैनुअल कूलिंग के लिए अन्य उपभोग्य सामग्रियों के अतिरिक्त पूरक की आवश्यकता नहीं होती है। इसे मैन्युअल रूप से संचालित किया जा सकता है। यह सबसे सरल है, लेकिन सरल नहीं है। वास्तविक ऑपरेशन परेशानी भरा है। और प्रभाव बहुत अच्छा नहीं है, क्योंकि यह शीतलन विधि अभी भी एक समान नहीं है, और यह अधिक नाजुक कोशिकाओं के लिए जरूरी नहीं है।
ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स: बाजार में बिकने वाला ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स विशेष रूप से फ्रीजिंग प्रक्रिया की एकसमान कूलिंग में उपयोग किया जाता है। ठंडा करने की गति आमतौर पर -1 डिग्री/मिनट होती है। फ्रोजन स्टोरेज ट्यूब को ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स में रखें, और मैन्युअल ग्रेडिएंट ऑपरेशन के बिना रात बिताने के लिए ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स को सीधे -80 डिग्री C के रेफ्रिजरेटर वातावरण में रखें। फिर डिपॉजिटरी ट्यूब को नीचे करें और इसे लिक्विड नाइट्रोजन में डाल दें। ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स का उपयोग करने का प्रभाव बेहतर है, क्योंकि बाजार पर वाणिज्यिक कूलिंग बॉक्स मोटे तौर पर एक समान शीतलन दर सुनिश्चित कर सकते हैं।
बाजार में दो सामान्य ग्रेडिएंट कूलिंग बॉक्स हैं। आमतौर पर एक पीसी बॉक्स बॉडी आइसोप्रोपिल जोड़ने की जरूरत है। उपयोग करते समय, आइसोपेनोल का उपयोग करते समय बॉक्स में स्केलिंग लाइन में जोड़ना। आइसोप्रोपानोल का उपयोग गर्मी भंडारण और वितरण के लिए वाहक के रूप में किया जाता है।
एक अन्य प्रकार को आइसोप्रोपिल, फोमिंग के साथ जोड़ने की आवश्यकता नहीं है, और फ्रीजर को सीधे उपयोग के दौरान रखा जा सकता है, जो संचालित करने के लिए अधिक सुविधाजनक है।
आइसोप्रोपानोल के कूलिंग बॉक्स को कई बार उपयोग करने के बाद तरल को बदलने की सिफारिश की जाती है, लेकिन क्योंकि आइसोप्रोपानोल एक हानिकारक तरल है, जो प्रयोगों और पर्यावरण को नुकसान पहुंचाता है, इसे आमतौर पर कई बार इस्तेमाल किया जा सकता है। हालांकि, यह सुनिश्चित करना आवश्यक है कि तरल एक निश्चित मात्रा में हो।
नॉन-प्रोग्राम्ड फ्रोजन स्टोरेज: नॉन-प्रोग्राम फ्रोजन लिक्विड का उपयोग करें जिसे बाजार से खरीदा जा सकता है। पारंपरिक जमे हुए तरल की तुलना में, आंतरिक घटक बर्फ क्रिस्टल की कोशिकाओं को नुकसान को कम कर सकता है, ताकि ढाल को ठंडा करने के लिए उपयोग करने की आवश्यकता न हो, न ही इसे ढाल शीतलन बॉक्स की आवश्यकता हो। जमे हुए भंडारण को सीधे -80 डिग्री सेल्सियस के रेफ्रिजरेटर वातावरण में रखा जा सकता है।
कई कोशिकाओं के नमूने बहुत कीमती होते हैं। हमारे अलावा, प्रयोग करते समय हमें इसका इस्तेमाल करना चाहिए। संबंधित उत्पाद चयन में भी आपको ज्यादा से ज्यादा अच्छे उत्पाद चुनने की जरूरत है। योग्य गुणवत्ता के साथ जमे हुए भंडारण ट्यूब का चयन करें, ठंड के लिए ग्रेडिएंट कूलिंग टूल का उपयोग करने का प्रयास करें, और मामूली नुकसान से बचने के लिए कोशिकाओं को कम नुकसान की गारंटी को अधिकतम करें।